Как приготовить рицин из семян клещевины
 |
Ботанические сведения. Семейство Молочайных (Euphorbiaceae).
Клещевина обыкновенная (Ricinus communis L.). Однолетнее растение, широко культивируется с техническими и лекарственными целями (для получения из семян касторового масла). Семена бобовидные, длиной 1—1,5 см, имеют твердую, серовато-пеструю скорлупу.
Токсические вещества и их действие. Ядами клещевины являются два вещества: токсальбумин рицин и алкалоид рицинин C 8 H 8 N 2 O 2 (Tuson, 1864). Рицин откладывается только в семенах (в основном в оболочке семян). Количество его может доходить до 0,1% и больше. Алкалоид рицинин находится во всех частях растения — в семенах до 0,15%, в молодых листьях до 1,37%, в жмыхах до 0,15—0,18%; ко времени цветения содержание рицинина в листьях снижается, одновременно увеличиваясь в цветках. Основное токсикологическое значение имеет рицин.
Общие симптомы при отравлении рицином наступают не сразу, а по истечении некоторого инкубационного периода, равного примерно 18—24 часам. Они проявляются в виде сильного геморрагического гастроэнтерита: коликами и кровянистыми поносами; в дальнейшем появляются признаки общей слабости, оглушение, ослабление сердечной деятельности, конвульсии. Особенно характерно действие рицина на эритроциты; уже в весьма малых разведениях он агглютинирует их (склеивает в заметные невооруженным глазом комочки). Агглютинируя эритроциты, рицин обусловливает нарушение капиллярного кровообращения в слизистой оболочке желудочно-кишечного тракта, мозге и других органах (образование тромбов, кровоизлияний, эрозий). В результате наступают функциональные расстройства этих органов.
Детальные исследования показали, что при остром отравлении рицин действует как капилляротоксический яд. Действуя на капилляры, он разрушает ткань лимфатических узлов, желез внутренней секреции, селезенки, костного мозга, семенников; вызывает изъязвления слизистой желудочно-кишечного тракта, дегенеративные изменения ткани печени, поражения органов сердечно-сосудистой системы (обусловливая миокардиты, пери-эндокардиты, периэндоваскулиты), отеки, кровоизлияния, развитые альвеолиты, бронхиолиты, пневмонии, бронхопневмонии — в легких; отеки мозга и мозговых оболочек, кровоизлияния в ткань мозга; поражения нервных клеток центральной и периферической нервной системы (Mosinger, 1957).
Токсикологическое значение. Причиной отравления клещевиной может быть как случайное поедание семян, например при перевозках, так и кормление животных жмыхами клещевины или другими жмыхами и кормами (овес), засоренными клещевиной. Одно хозяйство в Винницкой области потеряло значительное количество свиней, скормив им смолотые и смешанные с овсом семена клещевины; известно массовое отравление лошадей при перегоне их через посев клещевины, находившейся в стадии зрелости (И. В. Поддубский); наблюдались отравления овец в местах посева клещевины (после ее уборки).
Рицин ядовит для домашних животных всех видов и птиц. Нужны весьма небольшие количества семян, чтобы отравить животное: для лошади 30—50 г, для крупного рогатого скота 350— 450 г, для телят 20 г, для овец 30 г, для свиней 60 г; относительно устойчивее других животных козы (смертельная доза семян 105 — 140 г) и куры (смертельная доза семян 18 г). Таким образом, присутствие в корме 0,2% семян клещевины достаточно для того, чтобы обусловить отравление, в частности лошади.
В специальном опыте с лошадьми были получены следующие данные о значении дозы зерен (М. А. Быкова).
10 г зерен клещевины обусловили незначительное переболевание лошади с повышением температуры тела в течение двух дней (40,4—39,4°), явлениями колик, отсутствием аппетита; выздоровление на третий день;
20 г зерен клещевины обусловили более сильное переболевание лошади с повышением температуры тела, явлениями более сильных колик, отсутствием аппетита, судорожными сокращениями мышц в области паха; выздоровление — на четвертый день;
40 г клещевины обусловили смерть лошади на третий день; в клинической картине вызвали очень сильные колики;
70 г клещевины обусловили смерть лошади на шестой день; в клинической картине отравления — сильные колики и кровавый понос.
Естественные отравления клещевиной наблюдались у всех домашних животных: лошадей (П. С. Никольский, И. В. Поддубский), крупного рогатого скота, свиней, коз, собак, гусей. На гусей семена клещевины действуют послабляюще.
Использование мяса животных, вынужденно забитых при отравлении клещевиной, безвредно (А. К. Голосницкий, А. А. Шевцов). Необходимо тщательно обескровить тушу, а внутренние органы выбраковать.
Клиническая картина. Симптомы отравления у лошади становятся заметными через 18—24 часа. Отравления протекают с явлениями сильных геморрагических гастроэнтеритов: бурных колик и кровянистых поносов. Температура тела (в первое время) может быть повышенной (40—41°). Заметно сильное отделение пота. В отдельных случаях наблюдаются судорожные сокращения мускулатуры диафрагмы, заметные по вздрагиваниям брюшных покровов и слышные на расстоянии (П. С. Никольский). Дыхание судорожное, вдох и (особенно заметно) выдох происходят как бы в несколько приемов, создавая впечатление сильных болевых состояний. Отмечаются также общие судороги. Ощущение боли обусловливает напряженные, неестественные положения животных; вытянутое держание шеи и головы, подтянутость живота, устремленный, напряженный взгляд с широко открытыми зрачками; в отдельных случаях — даже состояние буйства. Лежа, лошади бьются головой о землю, вскидывают ее на грудь, смотрят на живот, часто пытаются встать; принимают позу сидящей собаки, вскакивают, падают снова. В дальнейшем появляются общая слабость, ослабление сердечной деятельности: сильный толчок сердца, слабый, очень частый (до 100 и более ударов в минуту) пульс; полная депрессия (голова опущена, общая чувствительность понижена, температура тела ниже нормы).
Клиническое течение одного экспериментального отравления лошади проявилось в следующем виде (М. А. Быкова).
Животное съело 70 г семян клещевины, симптомы отравления стали заметны через 18 часов.
1-й день. Температура тела 40,5°. Отказ от корма. В течение дня явления колик: животное беспокоится, переступает ногами, оглядывается на живот. Взгляд испуганный. Частое отхождение газов. Перистальтика кишок усилена. Сокращение мышц в области подвздоха. Стоны. Дыхание судорожное, прерывистое. Сердечный толчок усилен, заметен по вздрагиваниям грудной клетки; пульс частый (104), слабый.
2-й день. Температура тела 38,5°. Корм не принимает. Состояние угнетенное. Слизистые оболочки гиперемированы с желтушным оттенком. Явления сильных колик. Сердечный толчок крайне сильный, пульс 128, слабый, аритмичный. Дефекация частая, с выделением обычно небольших количеств разжиженных каловых масс. Походка связанная, шаткая.
3-й день. Температура тела 38,5°. Общее состояние угнетенное. Явления колик. Перистальтика усилена; пальпация живота болезненна; в каловых массах наличие крови. Дыхание более ровное. Сердечный толчок сильный, пульс 104.
4-й день. Температура тела 38,4°. Общее состояние угнетенное. Поведение более спокойно. Дыхание ровное. Пульс 102, слабый; сердечный толчок усилен.
5-й день. Температура тела 39°. Общее угнетение сильно выражено, животное лежит. Явления колик усилены и проходят в виде приступов, во время которых лошадь бьется головой о землю, вскидывает ее на грудь, подолгу смотрит на живот, стонет, внезапно встает на ноги, устремляется вперед, сталкивается с препятствиями, падает. Дефекация очень частая. Общая мышечная дрожь.
6-й день. Температура тела 40,6°. Животное лежит. Толчок сердца стучащий, пульс слабый, 102 в минуту. Очень сильное беспокойство: порывисто поднимается на ноги, делает стремительные движения вперед, буйствует, столкнувшись с препятствием, падает. Сильная общая дрожь. При положении на земле — непрерывные плавательные движения ногами. Понос, испражнения кровянисто окрашены. Смерть.
Клиническая картина отравления клещевиной у крупного рогатого скота, овец и свиней та же, что у лошади.
При экспериментальном скармливании телке (весом 120 кг) 150 г зерен клещевины с кормом первые симптомы заболевания появились через 5 часов. Они характеризовались повышенной температурой тела, учащением сердечной деятельности, отказом • от корма, отсутствием жвачки, повышением жажды; позднее по частому жилению, неестественному изгибанию спины, подбиранию под себя ног и беспокойному поведению с частой переменой положения можно было судить о сильных болях со стороны желудочно-кишечного тракта. На следующий день появилась прогрессивно увеличивающаяся слабость, нарушение сердечной деятельности, органов дыхания и желудочно-кишечного тракта: слабая, заплетающаяся, атаксическая походка; частый (до 120), аритмичный, трудно прощупываемый, временами исчезающий пульс; частое, неравномерное, с хрипами дыхание; бурная перистальтика кишечника; частая дефекация, усиливающаяся до степени профузного поноса с выделением водянистых каловых масс; гиперемия и желтушность слизистых оболочек. В последующие дни — состояние сильной депрессии, сильного упадка деятельности сердца и дыхания, болезненность в области живота, появление крови в каловых массах, относительное уменьшение поноса. Смерть наступила на шестой день при состоянии полной прострации животного (Козырев).
У овец клинические проявления отравлений становятся заметными также не сразу (через 5—6—24 часа, в зависимости от тяжести случая). Отравившиеся животные угнетены, отказываются от корма, при перегоне останавливаются, стоят с низко опущенной головой. Явления общего упадка сил (при летальных отравлениях) быстро прогрессируют; температура тела падает, дыхание и деятельность сердца ослабевают; смерть может наступить в ближайшие после отравления часы. Характерным признаком болезни является понос с содержанием крови и слизи. Смертность высокая (до 20%).
Клиническая картина экспериментального отравления овцы развивалась в следующей последовательности. Первые симптомы отравления наступили через 6 часов после скармливания клещевины. К вечеру первого дня было отмечено сильное угнетение, температура тела 40°, пульс 122, полный отказ от корма, частая дефекация жидкими каловыми массами. На следующий день — резкое угнетение; больное животное лежит с вытянутой шеей; подняться не может; слизистые оболочки гиперемированы с желтушной окраской; перистальтика кишечника бурная, каловые массы водянистые с содержанием слизи и крови; рефлексы отсутствуют; пульс едва ощутим, аритмичный; дыхание частое, поверхностное, хриплое; смерть на третий день; в состоянии агонии — бурное возбуждение, сильные судороги (А. К. Голосницкий, А. А. Шевцов, В. М. Козырев).
При скармливании клещевины свиньям первые признаки заболевания наступали через 8—20 часов. Клиническая картина отравления характеризовалась тошнотой, рвотой, общим угнетением, тяжелыми расстройствами со стороны деятельности сердца и дыхания, резким усилением перистальтики кишечника, частой болезненной дефекацией, принимавшей в дальнейшем характер профузного поноса, наличием слизи и крови в каловых массах, судорожными движениями ног, болезненностью в области живота, желтушностью слизистых оболочек.
У крупного рогатого скота в числе ранних симптомов отравления отмечают уменьшение или полное прекращение секреции молока.
Патологоанатомические изменения характеризуются признаками выраженного геморрагического воспаления слизистой оболочки пищеварительного тракта (сильной гиперемией и опуханием слизистой оболочки, множественными кровоизлияниями, кровянистым окрашиванием содержимого), резкими дегенеративными изменениями паренхиматозных органов (печени, почек, мышцы сердца), множественными кровоизлияниями в других органах.
Диагноз основывается главным образом на анализе корма. Присутствие клещевины в корме может быть легко обнаружено нахождением скорлупок или даже целых семян клещевины. Особое диагностическое значение имеет нахождение палисадных клеток, видимых при увеличении семенных скорлупок. Небольшую пробу скорлупок смешивают с эфиром, взбалтывают, эфир удаляют, а пробу 45—60 минут варят в слабом 0,5—1%-ном растворе натронного щелока. После такой обработки палисадные клетки представляются в виде длинно вытянутых, сильно утолщенных с одного конца и узких с другого клеточных образований, расположенных рядами в виде частокола.
Наличие рицина (в жмыхах, корме) может быть установлено также при помощи реакции агглютинации. Для этого подлежащий исследованию материал измельчают и экстрагируют в течение суток физиологическим раствором. После экстракт отфильтровывают. Для суждения об относительном количестве рицина применяют экстракт как в не разведенном виде, так и в виде растворов различной крепости, изготовленных также на физиологическом растворе (1 • 100; 1 : 200; 1 : 300; 1 : 500; 1 : 1000 и т. д.). В качестве второго компонента реакции употребляют 2%-ную взвесь эритроцитов. Для ее приготовления берут кровь кролика (шприцем из вены уха или просто осторожным надрезанием уха); чтобы получить 2 мл дефибринированной крови, нужно взять приблизительно 3 мл нормальной крови. Кровь дефибринируют и из 2 мл дефибринированной крови отмывают эритроциты повторным (2—3 раза) центрифугированием. Для этого налитую в центрифужную пробирку кровь разбавляют в 3—4 раза физиологическим раствором, осторожно перемешивают, опрокидывая пробирку несколько раз, уравновешивают на весах с другой пробиркой, содержащей воду, и центрифугируют в течение 5—8 минут. Под конец центрифугирования эритроциты оседают на дно пробирки; вверху остается слегка окрашенная в розовый цвет жидкость. Осторожно берут пипеткой верхний слой жидкости, стараясь не задевать эритроцитов; оставшиеся на дне пробирки эритроциты вновь разбавляют физиологическим раствором и повторяют центрифугирование до тех пор, пока жидкость над эритроцитами не будет бесцветной. Отмытые эритроциты разбавляют 100 мл физиологического раствора. Техника реакции состоит в следующем: в небольшие пробирки наливают равные объемы (2—3 мл) цельного и разведенного экстрактов, добавляют одинаковые количества взвеси эритроцитов; жидкости в пробирках осторожно перемешивают и оставляют стоять при комнатной температуре. Реакцию определяют на следующий день. При наличии агглютинации эритроциты слипаются в комочки и при встряхивании пробирки не окрашивают жидкости. Об относительном количестве рицина судят по степени разведения экстракта, в котором наступила полная агглютинация:, рицина много, если полная агглютинация наступила при разведении вытяжки от 1 : 10 000 до 1:15 000 и выше; корм содержит среднее количество рицина, если агглютинация наступила при разведении от 1 : 2000 до 1 : 10 000; рицина мало, если агглютинация наступила при разведении от 1 : 500 до 1 : 2000; рицина ничтожное количество (следы), если агглютинация наступила при разведении ниже чем 1 : 500; при полном отсутствии рицина реакция агглютинации не наступает (Е. А. Петросян).
При вскрытии трупов павших или вынужденно убитых животных (вскоре после отравления) нахождение в желудке целых или разжеванных семян и вегетативных частей клещевины указывает на причины отравления.
Терапия. Лечение рициновых отравлений чисто симптоматическое. Оно состоит в назначении внутрь средств, защищающих слизистую оболочку (обволакивающих, вяжущих); при коллапсе (сильная общая слабость, сердечная слабость, падение температуры тела) назначают возбуждающие средства (спирт, эфир, камфару); при сильном болевом возбуждении — болеутоляющие (опий, морфий).
С профилактической целью можно рекомендовать сильное прогревание или проваривание подозрительного корма. Необходимо только, чтобы прогревался весь корм. Опыты по применению различных методов обезвреживания рициновых жмыхов показали следующее: рицин инактивируется полностью только при температуре не ниже 150°; при испытании жмыхов, нагретых до 150°, явлений агглютинации не наступает; нагревание при более низких температурах (100—120°) не обусловливает обезвреживания рицина; одночасовая и двухчасовая варка жмыхов уничтожает активность рицина; при испытании проваренных жмыхов явлений агглютинации не наступает. При обработке жмыхов 10%-ным раствором хлористого натрия рицин полностью не удаляется (Е. А. Петросян, В. А. Пономарев).
Источник